Пиразинамид (ФС.2.1.0030.15)
Государственная фармакопея 13 издание (ГФ XIII)
ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ
ФС.2.1.0030.15 Пиразинамид — Pyrazinamidum
Взамен ВФС 42-3177-98
Пиразин-2-карбоксамид
C5H5N3O
М. м. 123,11
Cодержит не менее 99,0 % пиразинамида C5H5N3O в пересчете на безводное вещество.
Описание. Белый кристаллический порошок.
Растворимость. Умеренно растворим в воде, мало растворим в спирте 96 % и метиленхлориде.
Подлинность
1. ИК-спектр. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области частот от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца пиразинамида.
2. УФ-спектр. Ультрафиолетовый спектр поглощения 0,005 % раствора субстанции в воде в области длин волн от 290 до 350 нм должен иметь максимум поглощения при 310 нм.
3. УФ-спектр. Ультрафиолетовый спектр поглощения 0,001 % раствора субстанции в воде в области длин волн от 230 до 290 нм должен иметь максимум поглощения при 268 нм (удельный показатель поглощения от 640 до 680).
4. Качественная реакция. 0,1 г субстанции растворяют в 5 мл воды, прибавляют 1 мл 0,45 % раствора железа(II) сульфата в хлористоводородной кислоте; должно появиться оранжевое окрашивание. При добавлении 1 мл раствора натрия гидроксида разведенного 8,5 % раствор должен окраситься в темно-синий цвет.
Температура плавления. От 188 до 191 ºС (ОФС «Температура плавления»).
Кислотность или щелочность. 0,25 г субстанции растворяют в 25 мл воды, свободной от углерода диоксида, и перемешивают. К полученному раствору прибавляют 0,05 мл 0,1 % раствора фенолфталеина и 0,2 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида; раствор окрашивается в розовый цвет. Прибавляют 1,0 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты, раствор обесцвечивается. Прибавляют 0,15 мл 0,04 % раствора метилового красного; раствор окрашивается в красный цвет.
Родственные примеси. Определение проводят методом тонкослойной хроматографии (ТСХ).
Испытуемый раствор. 0,1 г субстанции растворяют в 10 мл смеси метанол – метиленхлорид (1:9).
Раствор сравнения. 1 мл испытуемого раствора разбавляют смесью метанол – метиленхлорид (1:9) до 50 мл. 1 мл полученного раствора разбавляют смесью метанол – метиленхлорид (1:9) до 10 мл.
Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. 0,01 г стандартного образца никотиновой кислоты растворяют в 5 мл смеси метанол – метиленхлорид (1:9). Прибавляют 1 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора до 10 мл смесью метанол – метиленхлорид (1:9).
На линию старта пластинки со слоем силикагеля 60 F254 наносят 20 мкл (200 мкг) испытуемого раствора, 20 мкл (0,4 мкг) раствора сравнения и 20 мкл раствора для проверки пригодности хроматографической системы. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру со смесью уксусная кислота ледяная – вода – бутанол (20:20:60) и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт подвижной фазы пройдет около 80 – 90 % длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при 254 нм.
Любое дополнительное пятно на хроматограмме испытуемого раствора не должно превышать по величине и интенсивности поглощения пятно на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %). Допустимое количество посторонних пятен на хроматограмме испытуемого раствора – не более 3.
Результаты испытания считаются достоверными, если на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы наблюдается четкое разделение 2 пятен.
Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды»). Для определения используют около 2,0 г (точная навеска) субстанции.
Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют около 1,0 г (точная навеска) субстанции.
Тяжелые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции (ОФС «Сульфатная зола»).
Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».
Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».
Количественное определение. Около 0,1 г (точная навеска) субстанции растворяют в 50 мл уксусного ангидрида и титруют полученный раствор 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически.
Параллельно проводят контрольный опыт.
1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 12,31 мг пиразинамида C5H5N3O.
Хранение. В хорошо укупоренной упаковке, в защищенном от света месте.