Анализ андрогенных гормонов и анаболических препаратов

Андрогенные гормоны и полусинтетические анаболические препараты. Препараты эстрогенных гормонов

Глава 8. Анализ производных терпенов и циклопентанпергидрофенантрена

АНДРОГЕННЫЕ ГОРМОНЫ И ПОЛУСИНТЕТИЧЕСКИЕ АНАБОЛИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ

Андрогенные гормоны вырабатываются мужскими половыми железами (тестикулами) в период половой зрелости.

В химическом отношении эти вещества являются производны­ми андростана:

Физические свойства

Белые с желтоватым оттенком мелкокристаллические порош­ки, нерастворимые в воде, растворимы в спирте, хлороформе и мас­лах.

Химические свойства и методы анализа

1. Для идентификации веществ используют общегрупповую ре­акцию на стероидный цикл с концентрированной Н₂SО₄: метилтестостерон и метмландростенлиол образуют желто-оранжевое окра­шивание с характерной флюоресценцией, метандростенолон — красное окрашивание.
2. Для обнаружения кетогруппы в 3-м положении (тестостерона пропионат, метилтестостерон, метандростенолон) проводят общие реакции образования оксимов, гидразонов, изоникотиноилгидразонов, фенил гидразонов:

Спиртовые группы (тестостерона в 17b-положении, метилтес­тостерона в 17β-положении, метандростендиола в 3β-17β-положении, метандростенолона в 17β-положении) обусловливают реакции образования сложных эфиров с характерной Т_пл:

Тестостерона пропионат можно идентифицировать по сложно-эфирной группировке:

по реакции гидролиза с последующей проверкой Т_пл выделя­ющегося тестостерона (150-156 °С):

по гидроксамовой реакции:

Количественное определение

1. Перечисленные реакции лежат в основе методов количествен­ного определения (гравиметрия оксимов, гидразонов; ФЭК гид­ро ксаматов).
2. Метод УФ-спектрофотометрии.
3. Фотоколориметрия (1 и 5 % масляные растворы тестостерона пропионата определяют по окраске изоникотиноилгидразона тес­тостерона пропионата).

Хранение

Андрогенные и анаболические стероидные препараты хранят по списку Б, в хорошо укупоренной таре, предохраняя от действия света и влаги.

ПРЕПАРАТЫ ЭСТРОГЕННЫХ ГОРМОНОВ

Эстрогенные гормоны вырабатываются в фолликулах. Они яв­ляются производными эстрана (кольцо А ~ ароматическое):

Известны 3 природных эстрогенных гормона:

Одним из основных эстрогенов является эстрадиол. Он имеет 2 гидроксила: в 3-м положении — фенольный ив 17-м — спиртовой, В качества ЛС применяется эстрадиола дипропионат. В этой форме вещество более устойчиво и оказывает пролонгированное действие.

Наряду с этим препаратом применяется синтетический аналог с этинильной группой (не гормон, но обладает эстрогенной актив­ностью) — эгинилэстрадиол. Выпускается в таблетках по 0,00001 и 0,00005 г. Применяется при гипофункции яичников как средство заместительной терапии, а также входит в состав оральных контра­цептивных средств (вместе с гестагенами).

Физические свойства

Белые, слет ка желтоватого цвета мелкокристаллические порошки, очень мало растворимые в воде, растворимы в спирте и щелочах, так как являются фенолами. За счет ароматического кольца А поглощают свет в УФ-области спектра (λ_maх = 280 нм).

Химические свойства и методы анализа

Подлинность вещества устанавливается общей цветной реакцией на стероидный цикл с концентрированной Н₂SО₄: этинилэстрадиол дает оранжево-красную окраску, местранол — кроваво-красное окрашива­ние с желтовато-зеленой флюоресценцией (в том и другом случае).

Эстрадиола дипропионат под действием концентрированной Н₂SО₄ гидролизуется с образованием пропионовой кислоты. Последующее нагревание в присутствии этанола ведет к образованию этилового эфира пропионовой кислоты, имеющего характерный запах:

Ароматическое кольцо А в стероидном цикле имеет фенольный гидроксил, и его можно идентифицировать по реакциям:

электрофильного замещения (бромирование, нитрование, об­разование азокрасителя, ауринового красителя). Например, азок­раситель получают путем сочетания фенола с солью диазония (из сульфаниловой кислоты) в щелочной среде. Образуется раствор темно-красного цвета. Эта реакция применяется для количествен­ного определения этинилэстрадиола в таблетках:

С реактивом Марки (формальдегид в концентрированной Н₂SО₄) образуется ауриновый краситель, окрашенный в малиновый или фиолетовый цвет;

соле- и комплексообразования е солями тяжелых металлов (например, с FеСl₃);

образования сложных эфиров (например, с бензоилхлоридом), которые имеют характерную Т_пл:

Эстрадиола дипропионат идентифицируют по образованию эст­радиола (Т_пл 173-179 °С) после щелочного гидролиза с последую­щей очисткой его от примесей.

Для идентификации используют ИК- и УФ -спектры лекарствен­ных веществ стероидной природы.

Для доказательства присутствия этинильной группы в структуре этинилэстрадиола применяется реакция с АgNО₃, Этинилэстрадиол количественно определяют методом косвенной нейтрализации (как и прегнин).

Методы количественного определения

1. ФЭК.

Этинилэстрадиол (таблетки) определяют по окраске азокрасителя:

2. Для количественного определения эстрадиола дипропиоиага используют реакцию омыления точно отмеренным количеством 0,1 М спиртового раствора гидроксида калия, избыток которого титруют 0,1 М раствором соляной кислоты (индикатор — фенолф­талеин):

Хранение

Список Б. Этинилэстрадиол хранят в хороню укупоренных бан­ках оранжевого стекла, а эстрадиола дипропионат — в сухом, защи­щенном от света месте.